Trong phân tích sinh học tiền lâm sàng, việc lựa chọn nền sinh học-huyết thanh hoặc huyết tương-không chỉ là một quyết định thông thường. Nó ảnh hưởng trực tiếp đến độ chính xác của dữ liệu, độ tin cậy của xét nghiệm và khả năng dịch củadược động học (PK)Vàdược lực học (PD)kết quả. Tại Prisys Biotech, một CRO tiền lâm sàng chuyên về các mô hình-linh trưởng không phải con người (NHP) và nghiên cứu tịnh tiến ở động vật lớn, chúng tôi nhấn mạnh việc lựa chọn ma trận chu đáo là một bước nền tảng trong quá trình phát triển thuốc ban đầu. Bài viết này phác thảo những khác biệt về mặt sinh lý, ý nghĩa phân tích và những cân nhắc chiến lược đằng sau việc lựa chọn ma trận.
Hiểu ma trận sinh học
Cả huyết thanh và huyết tương đều có nguồn gốc từ máu toàn phần, nhưng thành phần sinh hóa của chúng khác nhau đáng kể do sự hiện diện hay vắng mặt của các yếu tố đông máu.
huyết thanhlà phần chất lỏng thu được sau khi máu đông lại. Trong quá trình đông máu, fibrinogen chuyển thành fibrin, tạo thành lưới bẫy các tế bào máu. Sau khi ly tâm, chất lỏng-huyết thanh-còn lại chứa protein, hormone, axit nucleic và các chất phân tích khác nhưngthiếu fibrinogen và một số yếu tố đông máu.
Huyết tươngmặt khác, thu được bằng cách thêm chất chống đông máu (ví dụ EDTA, heparin, citrate) để ngăn ngừa đông máu, sau đó ly tâm. Huyết tương giữ lạifibrinogen và các yếu tố đông máu, cung cấp một sự thể hiện gần gũi hơn vềtrạng thái sinh lý in vivo.
Lựa chọn ma trận: Tại sao nó quan trọng
Việc lựa chọn giữa huyết thanh và huyết tương không phải là tùy tiện. Nhiều chất phân tích có nồng độ khác nhau tùy thuộc vào nền mẫu. Việc trộn lẫn các ma trận trong cùng một nghiên cứu có thể ảnh hưởng đến tính toàn vẹn của kết quả, làm chochuẩn hóa ma trậncần thiết cho việc so sánh hợp lệ và tuân thủ quy định.
Điểm mấu chốt:Đối với một chất phân tích nhất định, luôn sử dụng ma trận nhất quán trong suốt nghiên cứu.
Ưu điểm của Plasma
Huyết tương ngày càng được ưa chuộng trong phân tích sinh học hiện đại, đặc biệt là đối với-nghiên cứu NHP và động vật lớn do những ưu điểm về mặt khoa học và hoạt động sau:
1. Xử lý mẫu nhanh hơn
Huyết tương có thể được ly tâm ngay sau khi thu thập. Ngược lại, huyết thanh đòi hỏi mộtThời gian đông máu 30 phút, có thể kéo dài hơn ở những bệnh nhân có rối loạn đông máu hoặc đang điều trị bằng thuốc chống đông máu. Quá trình đông máu không hoàn toàn có thể tạo ra các cục máu đông nhỏ gây trở ngại cho các xét nghiệm hoặc thiết bị tiếp theo.
2. Năng suất cao hơn
Huyết tương thường chiếm ~55% thể tích máu toàn phần, trong khi sản lượng huyết thanh thấp hơn ~15–20%. Trong các nghiên cứu có lượng mẫu bị hạn chế-chẳng hạn như trong mô hình bệnh nhi hoặc bệnh máu khó đông-huyết tương cho phéptính linh hoạt phân tích cao hơn.
3. Giảm sự can thiệp từ quá trình đông máu
Quá trình đông máu làm thay đổi nồng độ chất phân tích bằng cách kích hoạt quá trình trao đổi chất của tế bào và giải phóng nội dung nội bào. Ví dụ,kali, LDH và ASTnồng độ thường tăng giả tạo trong huyết thanh. Ngược lại, các chất phân tích nhưđường glucozahoặctiểu cầucó thể giảm trong quá trình đông máu, khiến huyết tương trở thành lựa chọn ổn định hơn cho một số mục tiêu nhất định.
4. Nguy cơ gián đoạn xét nghiệm thấp hơn
Các mẫu huyết thanh thường chứa các sợi fibrin hoặc các cục máu đông nhỏ có thể chặn các dụng cụ phân tích hoặc cản trở các xét nghiệm miễn dịch. Plasma hoàn toàn tránh được vấn đề này khi được xử lý đúng cách.
Ưu điểm của huyết thanh
Bất chấp những lợi ích của huyết tương, huyết thanh vẫn là nền tảng tiêu chuẩn trong nhiều quy trình đã được thiết lập và có những ưu điểm riêng:
1. Giảm nguy cơ ô nhiễm tế bào
Các mẫu huyết thanh trải qua quá trình đông máu hoàn chỉnh, loại bỏ hiệu quả hầu hết các thành phần tế bào. Ngược lại,huyết tương có thể giữ lại tiểu cầu hoặc các mảnh tế bàonếu quá trình ly tâm ở mức dưới mức tối ưu, điều này có thể làm giảm tính toàn vẹn của mẫu theo thời gian hoặc theo chu kỳ đóng băng{0}}rã đông.
2. Độ ổn định của chất phân tích cụ thể
Một số chất phân tích chứng minhđộ ổn định hóa học cao hơntrong huyết thanh hơn huyết tương. Ví dụ: glucose có thể ổn định hơn trong huyết thanh ở điều kiện môi trường xung quanh, mặc dù đây là chất-đặc trưng của chất phân tích.
3. Không có sự can thiệp của thuốc chống đông máu
Chuẩn bị huyết tương cần có thuốc chống đông máu, một số trong đó (ví dụ EDTA, heparin) có thểcan thiệp vào các phương pháp phát hiện xuôi dòng, đặc biệt là xét nghiệm miễn dịch. Huyết thanh tránh được nguy cơ này hoàn toàn.
4. Dễ dàng vượt qua-So sánh nghiên cứu
Do tính phổ biến trong lịch sử của nó, nhiều phạm vi tham chiếu, phương pháp tiêu chuẩn và bộ dữ liệu kế thừa đều dựa trên huyết thanh. Đối với một số chương trình nhất định, điều này tạo điều kiện thuận lợiđiểm chuẩn và trình quy định.
Chọn ma trận phù hợp: Cân nhắc chiến lược
Không có câu trả lời phổ quát. Lựa chọn ma trận phải phù hợp với:
- Thuộc tính chất phân tích mục tiêu
- Yêu cầu về phương pháp phân tích
- Tiến trình nghiên cứu và các hạn chế xử lý mẫu
- Giới hạn khối lượng (đặc biệt là trong NHP hoặc mô hình bệnh tật)
- Tiền lệ pháp lý hoặc lịch sử
Đề xuất chính: Không trộn lẫn các ma trận trong cùng một dự án. Sau khi được chọn, hãy sử dụng cùng một ma trận một cách nhất quán để tránh sự thay đổi và đảm bảo khả năng so sánh dữ liệu.
Lựa chọn chất nền là một quyết định quan trọng nhưng thường bị bỏ qua trong phân tích sinh học tiền lâm sàng. Tại Prisys Biotech, chúng tôi giúp các nhà phát triển thuốc đưa ra các lựa chọn-dựa trên bằng chứng nhằm đảm bảo tính nhất quán trong phân tích và thành công trong dịch thuật. Cho dù sử dụng huyết tương để phản ánh sinh lý in vivo hay huyết thanh để phù hợp với các bộ dữ liệu cũ, chúng tôi đều điều chỉnh các chiến lược phân tích sinh học của mình cho phù hợp với nhu cầu cụ thể của từng nghiên cứu.
Giới thiệu về Công nghệ sinh học Prisys
Prisys Biotech là CRO tiền lâm sàng chuyên về-nghiên cứu chuyển giao và dược lý động vật quy mô lớn, tập trung vàoloài linh trưởng không phải người (khỉ cynomolgus). Các dịch vụ phân tích sinh học tích hợp của chúng tôi được thiết kế để hỗ trợ các nghiên cứu-PK, PD và độc tính chất lượng cao nhằm-kích hoạt IND và phát triển-giai đoạn đầu.
