Sàng lọc ADA cơ bản ở khỉ{0}}đã được rửa sạch để nghiên cứu sinh học tiền lâm sàng

Trong quá trình phát triển sinh học tiền lâm sàng, các loài linh trưởng không phải con người, đặc biệt là khỉ cynomolgus, thường được sử dụng trong các nghiên cứu về dược động học, dược lực học, độc tính và an toàn. Do số lượng động vật có sẵn hạn chế, chi phí nghiên cứu cao và áp lực ngày càng tăng trong việc đẩy nhanh tiến độ phát triển, việc tái sử dụng "những con khỉ{2}}đã bị loại bỏ" đôi khi được cân nhắc sau một khoảng thời gian-không dùng thuốc đầy đủ.

Tuy nhiên, đối với sinh học, việc thải thuốc không nhất thiết có nghĩa là thiết lập lại hệ miễn dịch. Một con khỉ có thể không có lượng thuốc còn sót lại có thể đo lường được từ nghiên cứu trước đó nhưng vẫn có khả năng phản ứng kháng thể kháng-thuốc cơ bản. Phản ứng này có thể đến từ việc tiếp xúc trước đó với một kháng thể sinh học, trí nhớ miễn dịch, kháng thể phản ứng chéo-khác hoặc nền tảng kháng thể xuất hiện tự nhiên. Nếu không được xác định trước khi dùng thuốc, ADA cơ bản có thể cản trở việc giải thích dữ liệu về phơi nhiễm, dược lý, an toàn và khả năng miễn dịch.

Do đó, khi xem xét những con khỉ-bị loại bỏ cho một nghiên cứu tiền lâm sàng mới, việc sàng lọc ADA cơ bản phải được đưa vào như một phần của quy trình đánh giá động vật. Mục đích không phải là dự đoán trực tiếp khả năng miễn dịch ở người mà là để cải thiện độ tin cậy và khả năng diễn giải của dữ liệu nghiên cứu trên động vật.

Những con khỉ{0}}bị loại bỏ không phải lúc nào cũng tương đương với những loài động vật ngây thơ. Việc tiếp xúc trước đây với kháng thể, protein tổng hợp, phân tử Fc được thiết kế, cytokine, protein PEGylat hoặc các chất sinh học khác có thể tạo ra kháng thể tồn tại sau khi thuốc ban đầu đã hết tác dụng. Các kháng thể này có thể nhận ra các thành phần cấu trúc chung trong vật phẩm thử nghiệm mới, chẳng hạn như vùng Fc, đột biến Fc, vùng bản lề, trình tự liên kết, glycans, gốc PEG, miền giàn giáo hoặc các trình tự được thao tác di truyền khác.

Nếu ADA cơ bản như vậy xuất hiện trước liều đầu tiên của một nghiên cứu mới, một số rủi ro có thể phát sinh. Bài viết thử nghiệm có thể cho thấy mức phơi nhiễm thấp bất ngờ, độ thanh thải nhanh hơn, thời gian bán thải- rút ngắn, phản ứng dược lực học giảm hoặc sự biến đổi bất thường ở từng cá nhân. Trong một số trường hợp, các phức hợp miễn dịch có thể hình thành và góp phần gây ra các phản ứng tiêm truyền, kích hoạt bổ thể, giải phóng cytokine hoặc các phát hiện khác liên quan đến miễn dịch.

Điều này tạo ra một thách thức giải thích lớn. Nếu không có thông tin cơ bản về ADA, có thể khó xác định liệu hồ sơ PK, PD hoặc an toàn bất thường có phản ánh các đặc tính nội tại của vật thử nghiệm hay lịch sử miễn dịch của động vật hay không.

Vì lý do này, việc sàng lọc ADA cơ bản ở những con khỉ{0}}đã bị loại bỏ nên được xem như một thước đo chất lượng-dữ liệu tiền lâm sàng. Nó giúp xác định liệu động vật được tái sử dụng có phù hợp với nghiên cứu dự kiến ​​hay không và liệu dữ liệu thu được có cần diễn giải đặc biệt hay không.

Để đảm bảo độ chính xác về mặt khoa học, thuật ngữ "ADA-có sẵn" phải được sử dụng cẩn thận trong ngữ cảnh này. Ở người, ADA-có sẵn thường đề cập đến các kháng thể xuất hiện trước khi tiếp xúc với một loại thuốc điều trị cụ thể. Ở những con khỉ{4}}đã bị loại bỏ, phản ứng cơ bản có thể là do tiếp xúc với thuốc thử nghiệm trước đó.

Các thuật ngữ phù hợp hơn bao gồm "khả năng phản ứng ADA cơ bản", "phản ứng ADA trước{0}}liều" hoặc "phản ứng kháng thể bài viết chống{1}}thử nghiệm{2}}cơ bản". Những thuật ngữ này tránh ngụ ý rằng các kháng thể xuất hiện tự nhiên và phản ánh tốt hơn mục đích thực tế của việc đánh giá.

Sàng lọc ADA cơ bản đặc biệt quan trọng khi sử dụng-những con khỉ bị loại bỏ trong các nghiên cứu then chốt hoặc giải thích-nhạy cảm. Chúng bao gồm các nghiên cứu về độc tính GLP, nghiên cứu về độc tính, nghiên cứu PK chính thức, đánh giá-phản ứng phơi nhiễm, đánh giá giới hạn an toàn và các nghiên cứu trong đó dấu ấn sinh học dược động học là trọng tâm của việc ra quyết định.

Nhu cầu cũng cao hơn đối với các chế phẩm sinh học có cấu trúc phức tạp hoặc có hoạt tính miễn dịch, chẳng hạn như kháng thể đặc hiệu kép, kháng thể đa đặc hiệu, protein tổng hợp Fc-, chất tham gia tế bào-miễn dịch, phân tử dựa trên cytokine-, protein PEGylat, biến thể Fc được thiết kế và các phân tử chứa trình liên kết không-tự nhiên hoặc các miền khung mới.

Đối với các nghiên cứu thăm dò hoặc không-GLP, chiến lược sàng lọc có thể được đơn giản hóa. Tuy nhiên, ngay cả trong những nghiên cứu ban đầu,-các mẫu trước liều lượng vẫn phải được thu thập và lưu giữ. Nếu tình trạng mất phơi nhiễm không mong muốn, dược lý yếu hoặc các phát hiện liên quan đến-miễn dịch xảy ra sau đó, thì những mẫu này có thể hỗ trợ điều tra hồi cứu.

Bạn có thể sử dụng khung-dựa trên rủi ro trước khi giao-những con khỉ bị loại vào một nghiên cứu sinh học mới.

Đầu tiên, cần xem xét hồ sơ nghiên cứu lịch sử của động vật. Thông tin quan trọng bao gồm bài viết thử nghiệm trước đó, định dạng phân tử, mức liều, đường dùng thuốc, khoảng thời gian dùng thuốc, ngày dùng liều cuối cùng, giai đoạn loại bỏ, trạng thái ADA trước đó, hồ sơ phơi nhiễm thuốc trước đây, phản ứng truyền thuốc, các phát hiện liên quan đến miễn dịch- và dữ liệu phục hồi.

Thứ hai, phải thu thập-mẫu huyết thanh hoặc huyết tương trước khi bắt đầu nghiên cứu mới. Đối với động vật có phơi nhiễm phức tạp trước đó hoặc khoảng thời gian rửa trôi ngắn, việc lấy mẫu lặp lại có thể hữu ích để xác định xem khả năng phản ứng của kháng thể có ổn định, giảm hay dao động hay không.

Thứ ba, nên đánh giá khả năng phản ứng của bài viết-chống thử nghiệm{1}}cơ bản bằng cách sử dụng xét nghiệm ADA-cho-mục đích phù hợp. Xét nghiệm không phải lúc nào cũng cần được xác nhận đầy đủ ở mức độ cần thiết cho xét nghiệm khả năng sinh miễn dịch lâm sàng, nhưng nó phải phù hợp với việc lựa chọn động vật và giải thích dữ liệu. Ở mức tối thiểu, nó sẽ giúp phân biệt các tín hiệu-bài viết-có thể thử nghiệm với nền không cụ thể.

Thứ tư, động vật dương tính nên được phân loại theo mức độ rủi ro. Mức độ-thấp hoặc phản ứng ranh giới có thể được chấp nhận ở một số môi trường khám phá, đặc biệt nếu động vật được cân bằng giữa các nhóm. Khả năng phản ứng vừa phải phải được xử lý thận trọng và diễn giải cùng với dữ liệu PK, PD và an toàn. Khả năng phản ứng cơ bản mạnh, độ đặc hiệu được xác nhận, hiệu giá cao hoặc khả năng trung hòa thường sẽ loại trừ động vật khỏi các nghiên cứu then chốt hoặc các nghiên cứu phụ thuộc nhiều vào diễn giải phơi nhiễm.

Thứ năm, kết quả ADA cơ bản phải được tích hợp với-các quan sát trong nghiên cứu. Một con vật-dương tính với ADA cơ bản mà sau này có biểu hiện thanh thải thuốc nhanh, mức phơi nhiễm thấp, phản ứng PD bất thường hoặc các phát hiện về tính an toàn liên quan đến miễn dịch- phải được giải thích khác với một con vật-âm tính ban đầu có các quan sát tương tự.

Việc sàng lọc ADA cơ bản không nên được coi là một bài tập đơn giản có-hoặc-không. Giá trị của nó nằm ở việc hỗ trợ lựa chọn động vật tốt hơn, phân công nhóm và giải thích dữ liệu.

Đối với độc tính GLP then chốt hoặc chìa khóa, nói chung nên tránh những động vật có khả năng phản ứng ADA cơ bản mạnh. Nếu phải sử dụng những con khỉ đã bị loại bỏ, lý do cơ bản phải được chứng minh một cách khoa học và tình trạng ADA cơ bản phải được ghi rõ ràng trong hồ sơ nghiên cứu và báo cáo cuối cùng.

Đối với các nghiên cứu PK/PD mang tính thăm dò, có thể sử dụng động vật-có nguy cơ thấp, trong khi động vật-có nguy cơ trung bình có thể được dành làm động vật dự phòng hoặc phân bố đều giữa các nhóm. Không nên chỉ định động vật-có nguy cơ cao vào các nhóm liều quan trọng trừ khi nghiên cứu được thiết kế đặc biệt để đánh giá tác động của ADA cơ bản.

Đối với các tổ chức tái sử dụng khỉ thường xuyên, nên xây dựng cơ sở dữ liệu miễn dịch động vật nội bộ. Cơ sở dữ liệu này sẽ nắm bắt tình trạng phơi nhiễm sinh học trước đây của từng động vật, lịch sử ADA, khoảng thời gian loại bỏ, khả năng phản ứng cơ bản với các vật phẩm thử nghiệm mới, PKhành vi, quan sát an toàn và kết quả tái sử dụng. Theo thời gian, dữ liệu đó có thể hỗ trợ nhiều hơn cho việc lựa chọn động vật dựa trên bằng chứng-và giảm bớt sự không chắc chắn trong cách diễn giải nghiên cứu tiền lâm sàng.

Việc sàng lọc ADA cơ bản ở những con khỉ{0}}đã bị loại bỏ có giá trị rõ ràng nhưng cũng có những hạn chế. Kết quả ADA của khỉ không thể được sử dụng để thay thế trực tiếp cho việc đánh giá rủi ro về khả năng sinh miễn dịch ở người. Sự khác biệt về loài trong lịch sử miễn dịch, nguồn kháng thể, sinh học thụ thể Fc, hoạt động bổ thể và phơi nhiễm môi trường hạn chế sự lây truyền trực tiếp sang người.

Ngoài ra, mức độ tích cực cơ bản của ADA không phải lúc nào cũng có nghĩa là động vật không phù hợp. Một số tín hiệu ở mức-thấp hoặc không{2}}trung hòa có thể có tác động hạn chế đến các điểm cuối của nghiên cứu. Ngược lại, kết quả ban đầu âm tính không loại bỏ hoàn toàn khả năng điều trị-xuất hiện ADA trong quá trình nghiên cứu.

Dạng xét nghiệm, chất lượng thuốc thử, chiến lược điểm cắt, khả năng dung nạp thuốc, ảnh hưởng mục tiêu và hiệu ứng nền mẫu cũng có thể ảnh hưởng đến kết quả. Vì lý do này, dữ liệu ADA cơ bản phải luôn được giải thích cùng với nồng độ thuốc, đáp ứng dược lực học, quan sát lâm sàng, cytokine, dấu hiệu bổ thể, phát hiện bệnh lý và tiền sử bệnh trước đó ở động vật.

Việc sử dụng-những con khỉ đã bị loại bỏ trong các nghiên cứu sinh học tiền lâm sàng có thể hợp lý về mặt khoa học và đạo đức khi lịch sử động vật, độ thanh thải thuốc và nền tảng miễn dịch được kiểm soát hợp lý. Tuy nhiên, chỉ rửa thuốc thôi là chưa đủ. Đối với sinh học, phản ứng ADA cơ bản có thể tồn tại và ảnh hưởng đến phơi nhiễm, dược lý học, tín hiệu an toàn và diễn giải khả năng miễn dịch.

Chiến lược sàng lọc ADA cơ bản phù hợp-cho{1}}mục đích cung cấp một cách thực tế để xác định những con khỉ bị loại bỏ- trước khi tái sử dụng. Nó giúp xác định-động vật có nguy cơ cao, hỗ trợ phân công nhóm cân bằng, cải thiện khả năng diễn giải dữ liệu và giảm nguy cơ đưa ra kết luận sai lệch về PK, PD hoặc an toàn.

Cách tiếp cận phù hợp nhất không phải là từ chối tất cả những con khỉ{0}}bị loại bỏ mà là sử dụng chúng theo một khung rủi ro-dựa trên bằng chứng có cấu trúc. Do đó, sàng lọc ADA cơ bản phải trở thành một phần của đánh giá-chuẩn bị nghiên cứu tiêu chuẩn khi những con khỉ{4}}bị loại bỏ được xem xét để phát triển sinh học.

Liên hệ với Prisys Biotech