1. Nghiên cứu phi lâm sàng bao gồm những gì?
Trả lời:Các thử nghiệm phi lâm sàng bao gồm nghiên cứu dược lý, xét nghiệm độc tính chung, thí nghiệm độc tính và dược động học phi lâm sàng, xét nghiệm độc tính sinh sản, xét nghiệm độc tính gen, khả năng gây ung thư và các xét nghiệm khác (độc tính quang, sự phụ thuộc, độc tính miễn dịch), v.v. Trong trường hợp điều trị kết hợp, nghiên cứu an toàn phi lâm sàng của liệu pháp kết hợp cũng có thể được tiến hành. Đối với một tỷ lệ cao nhất định (lớn hơn 10% tổng phơi nhiễm toàn thân và mức phơi nhiễm trong nghiên cứu trên động vật thấp hơn phơi nhiễm ở người), có thể cần phải tiến hành các nghiên cứu an toàn phi lâm sàng đối với các chất chuyển hóa.
2. Mục đích của việc đánh giá an toàn phi lâm sàng là gì?
Trả lời:Mục đích của việc đánh giá độ an toàn phi lâm sàng thường bao gồm làm sáng tỏ các đặc điểm phản ứng độc tính liên quan đến cơ quan đích, sự phụ thuộc vào liều lượng, mối quan hệ phơi nhiễm và khả năng đảo ngược. Thông tin này có thể được sử dụng để ước tính liều khởi đầu an toàn và khoảng liều cho các thử nghiệm lâm sàng ở người (như đã đề cập trước đó, NOAEL cần được lấy trong các thí nghiệm độc tính để tính MRSD, liều khởi đầu tối đa được khuyến nghị) và để xác định các chỉ số theo dõi lâm sàng về các phản ứng bất lợi tiềm ẩn.
3. Những nghiên cứu phi lâm sàng nào cần thiết cho các thử nghiệm-trong-con người đầu tiên?
Trả lời:Đối với câu hỏi này, trước tiên cần phải làm rõ loại thuốc. ICH M3 (R2) có thể áp dụng cho các tình huống phổ biến trong phát triển thuốc và cung cấp các nguyên tắc hướng dẫn chung. Đối với sinh học, các nghiên cứu phi lâm sàng phải được thực hiện theo yêu cầu của ICH S6.
⑴Dược động học:Trước khi nộp IND, dữ liệu về chuyển hóa của sản phẩm nghiên cứu ở các loài khác nhau và dữ liệu chuyển hóa trong ống nghiệm ở người, cũng như tốc độ liên kết với protein huyết tương là đủ. Thông tin về sự hấp thụ, phân bố, chuyển hóa và bài tiết trong cơ thể phải được hoàn thiện trước khi-thử nghiệm lâm sàng quy mô lớn (thường là giai đoạn 3). Các thí nghiệm hấp thụ PK thường được tiến hành ở nhiều loài trước khi nộp IND và xác định PCC để hiểu rõ hơn về đặc tính PK của thuốc ở các loài khác nhau, mặc dù điều này không bắt buộc ở đây, điều này hơi lạ.
⑵Dược lý an toàn:Việc đánh giá tác động lên hệ tim mạch, thần kinh trung ương và hô hấp phải được hoàn thành trước khi nộp IND, đây là sự kết hợp của các xét nghiệm tiêu chuẩn về an toàn dược lý. Các thử nghiệm dược lý về an toàn bổ sung có thể được tiến hành trong các thử nghiệm lâm sàng nếu cần thiết.
⑶Độc tính liều lặp lại:Nói chung, xét nghiệm độc tính mãn tính ngắn hạn-được sắp xếp dựa trên sơ đồ dùng thuốc sớm của IND. Nếu cần kéo dài thời gian dùng thuốc sau đó thì cần phải có-thử nghiệm độc tính mãn tính dài hạn hơn để hỗ trợ.
⑷Độc tính di truyền:Với chi phí tương đối thấp, việc kết hợp xét nghiệm độc tính gen có thể được hoàn thành trước khi nộp IND.
⑸Tính gây ung thư:Thử nghiệm khả năng gây ung thư phải được hoàn thành trước khi phê duyệt thuốc.
⑹Độc tính sinh sản:Các quan sát và đánh giá hệ thống sinh sản phải được đưa vào các xét nghiệm độc tính liều lặp lại trước khi nộp IND để đánh giá sơ bộ độc tính sinh sản, với biện pháp tránh thai nghiêm ngặt trong các thử nghiệm lâm sàng là đủ. Các nghiên cứu về độc tính sinh sản ở giai đoạn I/II phải được hoàn thành trước khi thử nghiệm lâm sàng-quy mô lớn và các nghiên cứu về độc tính sinh sản ở giai đoạn III phải được hoàn thành trước khi được phê duyệt.
⑺Độc tính quang học:Đánh giá độc tính quang học phải được hoàn thành trước khi nộp IND. Nếu độ hấp thụ mol lớn hơn 1000 M-1cm-1 thì được coi là có nguy cơ nhiễm độc quang và cần tiến hành thử nghiệm độc tính quang trước khi thử nghiệm lâm sàng quy mô lớn.
4. Nên đặt liều lượng như thế nào trong các xét nghiệm độc tính? Nên chọn liều cao nhất như thế nào?
Trả lời:Đề cập đến "Nguyên tắc hướng dẫn kỹ thuật cho các thử nghiệm độc tính liều lặp lại của thuốc", "Về nguyên tắc, liều cao sẽ gây ra phản ứng độc hại rõ ràng ở động vật, liều thấp phải tương đương hoặc cao hơn liều hiệu quả ở động vật hoặc sử dụng lâm sàng và liều trung bình nên được đặt giữa liều cao và liều thấp dựa trên cơ chế và đặc điểm độc hại để kiểm tra mối quan hệ-phản ứng của độc tính."
Trong thực tế, xét đến chi phí đắt đỏ của các xét nghiệm độc tính, việc tiến hành-thử nghiệm xác định phạm vi liều lượng (DRF) với một số loài linh trưởng không phải là con người-là phương pháp tiết kiệm-công sức và tiết kiệm chi phí-hiệu quả nhất. Liều cho các xét nghiệm DRF cũng nên được thiết lập thêm dựa trên các nghiên cứu an toàn sơ bộ được thực hiện trong quá trình xác định sớm PCC và các nghiên cứu dược lý. Nhiều tổ chức hiện cũng tiến hành các xét nghiệm độc tính cấp tính cùng với các xét nghiệm DRF, là các xét nghiệm không-GLP, như đã đề cập trong M3 (R2), tuân theo nguyên tắc 3R để giảm việc sử dụng động vật.
Đối với các nhóm liều thấp, trung bình và cao, khoảng cách thường được sử dụng là 2-3 lần. Trong các thử nghiệm độc tính chính thức, tình huống lý tưởng là nhóm liều cao có thể biểu hiện độc tính rõ ràng và nhóm liều thấp hoặc trung bình có thể được sử dụng làm NOAEL.
Ngoài ra, đối với việc lựa chọn liều lượng cao nhất, M3 (R2) cũng đưa ra đáp án tiêu chuẩn. Nói một cách đơn giản, liều cao nhất trong độc tính học phải là liều dung nạp tối đa (MTD) hoặc liều khả thi tối đa (MFD, có thể hiểu là liều tối đa mà động vật có thể chịu đựng được dựa trên đặc tính của sản phẩm và động vật), hoặc phải đạt được độ bão hòa phơi nhiễm hoặc mức phơi nhiễm phải đủ cao (đạt 50 lần liều lâm sàng dự kiến). Nói chung, 1000 mg/kg/ngày được coi là đủ trừ khi liều lâm sàng dự định đạt 1g/ngày và mức phơi nhiễm 1000 mg/kg không đạt tới 10 lần mức phơi nhiễm lâm sàng, trong trường hợp đó bạn cần tăng thêm liều lên 10 lần mức phơi nhiễm lâm sàng, hoặc 2000 mg/kg/ngày, hay MFD.
5. Những nghiên cứu nào trong nghiên cứu an toàn phi lâm sàng cần tuân theo GLP và nghiên cứu nào không?
Trả lời:Các nghiên cứu về dược lý và dược động học không cần tuân theo GLP, trong khi các nghiên cứu về dược lý an toàn, độc tính di truyền, độc tính sinh sản và độc tính liều lặp lại cần phải tuân theo GLP.
6. Thời gian của các nghiên cứu độc tính liều lặp lại phi lâm sàng là bao lâu?
Trả lời:Các yêu cầu về thời lượng để hỗ trợ tiến hành thử nghiệm lâm sàng và phê duyệt thị trường là khác nhau và cần phải cụ thể đối với giai đoạn dùng thuốc của thử nghiệm lâm sàng. Ví dụ, đối với bệnh nhân mắc bệnh đa xơ cứng, thời gian thử nghiệm lâm sàng tối thiểu theo kế hoạch là hai năm. Do đó, khi đăng ký bệnh nhân mắc bệnh đa xơ cứng vào các thử nghiệm lâm sàng, cần phải có một nghiên cứu độc tính mãn tính kéo dài 6{4}}đối với loài gặm nhấm và 9-tháng đối với loài gặm nhấm không-, đủ để hỗ trợ cho việc phê duyệt trên thị trường. Đối với các loại thuốc không dùng để điều trị ung thư, nghiên cứu độc tính mãn tính kéo dài 4 tuần thường được sử dụng để hỗ trợ khoảng thời gian dùng thuốc không quá 4 tuần cho các thử nghiệm lâm sàng đầu tiên trên người.
7. Lựa chọn động vật thí nghiệm để đánh giá an toàn phi lâm sàng như thế nào?
Trả lời:Nói chung, hai loại động vật được sử dụng, ưu tiên chọn loài gặm nhấm là chuột và loài không phải loài gặm nhấm là chó Beagle. Tất nhiên, bạn cũng phải tuân thủ các nguyên tắc phân tích cụ thể-của sản phẩm cụ thể. Đối với các phân tử nhỏ, việc lựa chọn loài chủ yếu cần xem xét đến đặc điểm trao đổi chất của sản phẩm nghiên cứu ở động vật tương tự như con người. Có thể tham khảo "Thử nghiệm phân tích và xác định chất chuyển hóa của các sản phẩm nghiên cứu ở chuột CD-1, chuột SD, chó Beagle, khỉ Cynomolgus và microsome gan người", chọn ra các loài có đặc điểm trao đổi chất tương tự như con người, nghĩa là các loài có lượng và loại chất chuyển hóa tương tự như con người. Ngoài ra, các loài được chọn phải nhạy cảm với sản phẩm nghiên cứu. Dựa trên kinh nghiệm trước đây, đối với một loại thuốc phân tử nhỏ, đặc điểm trao đổi chất của nó ở chó Beagle có thể giống với con người nhưng mức độ phơi nhiễm thấp.
