Phân tích dịch não tủy (CSF) là một công cụ mạnh mẽ để tăng cường phát hiện các quá trình khác nhau xảy ra trong hệ thần kinh trung ương, chẳng hạn như chảy máu, viêm, nhiễm trùng, khối u và các tình trạng lâm sàng khác. Ngoài ra, việc đánh giá nối tiếp các hợp chất trong CSF (chẳng hạn như hormone, thuốc, chất dẫn truyền thần kinh, dấu ấn sinh học, chất chuyển hóa và vi rút) đều quan trọng như nhau trong cả nghiên cứu cơ bản và nghiên cứu tịnh tiến. Thể tích dịch não tủy trong hệ thần kinh trung ương được duy trì ổn định thông qua quá trình bài tiết và hấp thu.
I. Cân nhắc hoạt động
CSF thường được thu thập thông qua chọc dò não thất hoặc thắt lưng. Chọc dò thắt lưng có nguy cơ biến chứng tương đối thấp hơn ở các loài linh trưởng không phải con người-vì ở hầu hết các loài, vị trí chọc dò thắt lưng cách xa đầu tủy sống. Cần phải có các kỹ thuật gây mê và vô trùng thích hợp, bao gồm việc chuẩn bị tại chỗ như cạo râu và sử dụng các vật liệu vô trùng. Ít nhất nên sử dụng găng tay, ống tiêm và kim tiêm vô trùng, đồng thời cân nhắc đến khăn trải phẫu thuật vô trùng. Việc thu thập CSF thường được thực hiện ở tư thế nằm nghiêng, nằm ở xương ức hoặc tư thế ngồi, cải thiện khả năng tiếp cận não thất hoặc mở rộng không gian giữa các đốt sống thông qua việc uốn cong cổ hoặc cột sống. Kích thước và chiều dài của kim được chọn phải phù hợp với loài và kích thước của loài linh trưởng không phải con người. Kỹ thuật, thiết bị, vật tư tiêu hao được sử dụng trong quá trình thực hiện và chăm sóc chu phẫu khác nhau tùy thuộc vào loài, mục tiêu nghiên cứu và sở thích của bác sĩ thú y lâm sàng.
Một số quy trình nghiên cứu có thể yêu cầu thu thập CSF liên tục theo thời gian hoặc thu thập mẫu CSF từ các đối tượng không được gây mê. Đối với các giao thức này, có thể thực hiện việc thu thập CSF liên tục từ khỉ rhesus còn thức thông qua-các ống thông CSF được cấy ghép dài hạn được kết nối với các cổng thu thập dưới da.
Tác giả đã nỗ lực tìm kiếm các tài liệu tham khảo mới nhất về tổng thể tích dịch não tủy, các giới hạn hoặc khuyến nghị về chọc thủng màng cứng, tần suất lấy máu, thể tích rút ra an toàn và tốc độ bổ sung dịch não tủy. Tài liệu về khía cạnh này chỉ dành cho hầu hết các loài linh trưởng không phải con người. Ngoài ra, các phương pháp thu thập cũng khác nhau, vì các cuộc khảo sát từ các thành viên của Hiệp hội Thú y Linh trưởng Không phải Con người cho thấy rằng các tổ chức khác nhau đã sử dụng thành công các phương pháp khác nhau để thu thập CSF. Vì vậy, tác giả đưa ra những cân nhắc và khuyến nghị cho việc thu thập CSF dựa trên những bằng chứng tốt nhất hiện có.
Để tham khảo, các nghiên cứu trước đây đã xác định rằng thể tích CSF rõ ràng ở khỉ rhesus đực trưởng thành (8,0-10,6 kg) là 10+/-0,06 mL, với tốc độ dòng CSF là 0.018+/-0,003 mL/phút. Tốc độ hình thành CSF ở khỉ rhesus dao động từ 28,6-44,2 μL/phút. Cần nghiên cứu sâu hơn về các loài linh trưởng không phải con người trong lĩnh vực này để tạo điều kiện phát triển các khuyến nghị mang tính hướng dẫn hơn.
II. Phản ứng bất lợi tiềm ẩn
Mặc dù các biến chứng trong quá trình thu thập CSF ở các loài linh trưởng không phải con người là-hiếm, nhưng các biến thể về mặt giải phẫu và phương pháp kỹ thuật không phù hợp hoặc không đầy đủ có thể dẫn đến hư hỏng mẫu hoặc các biến chứng như chảy máu, thoát vị, nhiễm trùng, tổn thương thân não, tủy sống hoặc rễ thần kinh và khiến động vật cảm thấy khó chịu. Mặc dù những biến chứng này rất hiếm nhưng chúng có thể ảnh hưởng đến phúc lợi động vật.
Do những rủi ro liên quan, CSF phải được thu thập bởi bác sĩ thú y hoặc nhân viên thú y đã được đào tạo. Đối với những nỗ lực thu thập CSF không thành công, cách thực hành có thể khác nhau. Thông thường, một cá nhân có thể cho phép tối đa ba lần thử không thành công. Sau lần thử thứ ba không thành công, một cá nhân đủ tiêu chuẩn khác sẽ tiếp quản. Nếu cá nhân thứ hai không thể thu thập CSF sau ba lần thử thì nên dừng lại. Trong khi đó, con vật sẽ được điều trị giảm đau thích hợp và hồi phục sau khi gây mê. Thay đổi vị trí thu thập (ví dụ, từ não thất sang thắt lưng) sau những nỗ lực không thành công thường dẫn đến thành công. Nếu thất bại mà không có hướng dẫn bằng hình ảnh, có thể sử dụng phương pháp đặt kim hỗ trợ nội soi huỳnh quang-. Bên cạnh việc tăng tỷ lệ thành công, hướng dẫn bằng hình ảnh cũng có thể làm giảm tỷ lệ chấn thương.
Việc theo dõi sau phẫu thuật nên tiếp tục cho đến khi con vật trở về lồng và có thể duy trì tư thế thẳng đứng mà không cần hỗ trợ. Việc giám sát động vật phải kéo dài ít nhất 24 giờ hoặc theo quy trình đã được Ủy ban Chăm sóc và Sử dụng Động vật Thể chế (IACUC) phê duyệt. Việc giám sát nên bao gồm đánh giá các thông số sinh lý, hành vi và vận động cơ bản. Các dấu hiệu rối loạn chức năng thần kinh, bao gồm nhưng không giới hạn ở tình trạng thờ ơ, trầm cảm, hôn mê và các dấu hiệu ấn đầu, cần được đánh giá cụ thể. Nhức đầu và hậu quả là hạ huyết áp nội sọ sau khi thu thập CSF không phải là hiếm gặp trong y học ở người. Xem xét biến chứng tiềm ẩn này ở các loài linh trưởng không phải con người, nên điều trị giảm đau trong khi phẫu thuật và tiếp tục trong 2-3 ngày sau phẫu thuật hoặc khi cần dựa trên các quan sát sau phẫu thuật liên quan đến hành vi liên quan đến đau đầu hoặc đau cột sống. Phác đồ giảm đau hiệu quả nhất có thể bao gồm việc điều trị toàn diện được bắt đầu trước phẫu thuật.
III. IACUC cân nhắc và lưu giữ hồ sơ
IACUC nên làm quen với các quy trình liên quan đến thu thập CSF và tất cả các biến chứng tiềm ẩn và xem xét chúng ít nhất hàng năm. Tất cả thông tin liên quan, chẳng hạn như liều lượng thuốc, chế phẩm trước phẫu thuật, lượng CSF được thu thập, tần suất thu thập cũng như quá trình phục hồi sau phẫu thuật ngắn hạn và dài hạn{2}} phải được mô tả trong giao thức IACUC và được ghi lại một cách thích hợp trong hồ sơ y tế hoặc nhật ký phòng thí nghiệm.
Mặc dù CSF có thể là dữ liệu quan trọng trong các quy trình nghiên cứu nhưng kỹ thuật thu thập không đúng cách có thể ảnh hưởng đến phúc lợi động vật. Khi gửi đề cương, cần đưa ra bằng chứng khoa học về số lượng và tần suất thu thập. Cụ thể, IACUC nên đánh giá cẩn thận từng đề xuất liên quan đến việc thu thập CSF và xem xét những điều sau:
1. Việc thu thập CSF có cần thiết để đạt được các mục tiêu khoa học được nêu trong quy trình không?
2. Có sẵn các phương pháp thay thế và phương pháp đánh giá hệ thần kinh trung ương ít xâm lấn hơn (chẳng hạn như kỹ thuật hình ảnh) không, và nếu có thì chúng đã được xem xét chưa?
3. Người vận hành có được đào tạo phù hợp và có đủ kỹ năng không?
4. Liệu chế độ gây mê và giảm đau chu phẫu có được cung cấp phù hợp không? Nên tham khảo ý kiến của bác sĩ thú y trong phòng thí nghiệm về kế hoạch gây mê và giảm đau.
5. Khối lượng CSF thu thập có tính đến độ tuổi và kích thước của động vật không?
6.Số lượng và tần suất chọc thủng màng cứng có phù hợp với động vật và nguy cơ biến chứng có được giảm thiểu không? Nếu nhiều bộ sưu tập CSF là một phần của nghiên cứu thì phải chỉ định thời gian thu thập tối đa cho mỗi con vật.
7. Kế hoạch theo dõi sau phẫu thuật có phù hợp không?
8. Tất cả các biến chứng có thể xảy ra sau phẫu thuật đã được xem xét và tất cả các biện pháp can thiệp hợp lý, bao gồm cả trợ tử, đã được liệt kê chưa?
